分子实验入门
DNA 乙醇沉淀：100 μL 纯化 DNA 的浓缩与洗盐
以普通教学双链 DNA 为样本，明确乙酸钠加量、离心相对离心力、70%乙醇洗涤及回收率计算。
约90分钟
从第一次配液，到独立完成实验
实验怎么做？
从这一步开始。
用量配清楚，时间写明白，操作拆成每一步。
细胞、分子、动物实验，还有图解与实用文档。
YOUR FIRST EXPERIMENT先知道加多少，
先知道加多少，
再知道下一步做什么。
01核对体系02照表配液03逐步操作04检查结果
每篇都从适用条件开始，配套用量、时间和记录。
全部实验方法
141 篇指南分子实验入门
Bradford 蛋白定量：5 μL 样本的595 nm微孔板法
用指定即用型Bradford体系、六点BSA标准和独立检查样本完成双孔测量，识别去污剂干扰及非线性曲线。
约45分钟
分子实验入门
考马斯凝胶染色：水基G-250小胶染色与背景清洗
使用明确的即用型G-250体系，给出水洗、染色、清背景、总蛋白对照及原始全胶保存步骤。
约3–5小时，不含电泳
分子实验入门
TAE/TBE 电泳缓冲液：配浓缩液与核对工作倍数
分别配100 mL标准50×TAE或5×TBE，明确EDTA来源和稀释计算，纠正旧手册倍数及配方抄录错误。
约60分钟
分子实验入门
Tris、EDTA与TE：从明确盐型配制pH8.0 DNA保存液
配100 mL Tris与EDTA母液，再制100 mL TE；明确Tris碱分子量、EDTA二水盐和定容顺序。
约90分钟
分子实验入门
核酸紫外定量：1 cm石英比色皿测纯化双链DNA
用1 cm光程、同基质空白和两个稀释倍数测A230–A320，区分浓度估算、浑浊和纯度比值的解释边界。
约45分钟
分子实验入门
限制酶消化：Promega EcoRI单酶切教学质粒
固定为EcoRI、配套Buffer H与50 μL反应，使用普通商业教学DNA和独立对照，避免套用通用热灭活条件。
酶切约1小时；含电泳约3小时
分子实验入门
T4 DNA连接：商业标准片段的体外连接与无酶对照
以纯化商业λ DNA/HindIII标准片段示范连接，固定Weiss单位、含ATP缓冲液与22°C三小时，不涉及载荷设计和转化。
反应3小时；含电泳约5小时
分子实验入门
丽春红转膜检查：染色、全膜拍照与可逆脱色
在封闭前用指定即用型Ponceau S检查NC膜的转移均匀度，记录空白和已知蛋白对照，再充分脱色进入免疫检测。
约30–45分钟
分子实验进阶
BSL1大肠杆菌CTAB基因组DNA提取：1.5 mL菌液的传统路线
限定非致病K-12实验室株，给出SDS/蛋白酶K裂解、高盐CTAB处理、有机抽提及异丙醇沉淀的完整操作。
约3–4小时，另加重溶过夜
分子实验进阶
培养细胞酚氯仿基因组DNA：100万细胞的SDS/蛋白酶K路线
从已收集普通培养细胞开始，以明确的裂解体系、有机分相和乙醇沉淀获得常规基因组DNA。
约4小时，重溶另过夜
分子实验进阶
冻融挤出法DNA胶回收：200 mg胶块的无柱教学路线
用冻结破胶和离心挤出释放DNA，再以有机抽提和醇沉淀净化；明确不保证定量回收。
约2.5–3小时