分子实验入门
Tris、EDTA与TE：从明确盐型配制pH8.0 DNA保存液
配100 mL Tris与EDTA母液，再制100 mL TE；明确Tris碱分子量、EDTA二水盐和定容顺序。
约90分钟
从第一次配液，到独立完成实验
实验怎么做？
从这一步开始。
用量配清楚，时间写明白，操作拆成每一步。
细胞、分子、动物实验，还有图解与实用文档。
YOUR FIRST EXPERIMENT先知道加多少，
先知道加多少，
再知道下一步做什么。
01核对体系02照表配液03逐步操作04检查结果
每篇都从适用条件开始，配套用量、时间和记录。
分子实验
73 篇指南分子实验入门
核酸紫外定量：1 cm石英比色皿测纯化双链DNA
用1 cm光程、同基质空白和两个稀释倍数测A230–A320，区分浓度估算、浑浊和纯度比值的解释边界。
约45分钟
分子实验入门
限制酶消化：Promega EcoRI单酶切教学质粒
固定为EcoRI、配套Buffer H与50 μL反应，使用普通商业教学DNA和独立对照，避免套用通用热灭活条件。
酶切约1小时；含电泳约3小时
分子实验入门
T4 DNA连接：商业标准片段的体外连接与无酶对照
以纯化商业λ DNA/HindIII标准片段示范连接，固定Weiss单位、含ATP缓冲液与22°C三小时，不涉及载荷设计和转化。
反应3小时；含电泳约5小时
分子实验入门
丽春红转膜检查：染色、全膜拍照与可逆脱色
在封闭前用指定即用型Ponceau S检查NC膜的转移均匀度，记录空白和已知蛋白对照，再充分脱色进入免疫检测。
约30–45分钟
分子实验进阶
BSL1大肠杆菌CTAB基因组DNA提取：1.5 mL菌液的传统路线
限定非致病K-12实验室株，给出SDS/蛋白酶K裂解、高盐CTAB处理、有机抽提及异丙醇沉淀的完整操作。
约3–4小时，另加重溶过夜
分子实验进阶
培养细胞酚氯仿基因组DNA：100万细胞的SDS/蛋白酶K路线
从已收集普通培养细胞开始，以明确的裂解体系、有机分相和乙醇沉淀获得常规基因组DNA。
约4小时，重溶另过夜
分子实验进阶
冻融挤出法DNA胶回收：200 mg胶块的无柱教学路线
用冻结破胶和离心挤出释放DNA，再以有机抽提和醇沉淀净化；明确不保证定量回收。
约2.5–3小时
分子实验入门
PCR引物设计与体外检查：从模板版本到退火梯度
用一段无害教学DNA完成候选引物设计、特异性检查、配液与三温度PCR验证。
设计1–2小时，验证约2小时
分子实验进阶
PCR污染定位：分区、试剂替换与擦拭对照
用10管无害教学PCR定位试剂或台面污染，以可追溯对照决定是否恢复实验。
约3小时
分子实验进阶
酚氯仿PCR纯化：100 μL教学产物的去蛋白与浓缩
以明确pH的酚氯仿抽提与乙醇沉淀处理PCR产物，区分去蛋白与选择性去引物。
约2小时
分子实验入门
大肠杆菌菌落PCR：八个K-12克隆的插入筛查
先复制保种再取少量菌作模板，使用空载体、阳性克隆和NTC解释插入大小。
约2.5小时，保种培养另过夜