细胞实验入门
第一次进细胞房：配 100 mL 完全培养基并给 HeLa 换液
以 ATCC HeLa CCL-2 为明确示例，从培养基配比、柜内摆放到一瓶 T25 的实际换液，逐项写清用量和终点。
首次准备约 45–60 分钟；次日观察 5 分钟
从第一次配液，到独立完成实验
实验怎么做？
从这一步开始。
用量配清楚，时间写明白，操作拆成每一步。
细胞、分子、动物实验，还有图解与实用文档。
YOUR FIRST EXPERIMENT先知道加多少，
先知道加多少，
再知道下一步做什么。
01核对体系02照表配液03逐步操作04检查结果
每篇都从适用条件开始，配套用量、时间和记录。
全部实验方法
141 篇指南细胞实验入门
HeLa CCL-2 贴壁传代：一瓶 T75 分成三瓶的完整例子
固定使用 ATCC HeLa CCL-2 和 T75，写清 PBS 清洗、2 mL 胰酶解离、8 mL 培养基终止及 1:3 分装体积。
实际操作约 35–50 分钟；次日检查贴壁
细胞实验入门
台盼蓝与血球计数板：从 20 µL 样本算到实际接种量
以标准改良 Neubauer 计数板与0.4%台盼蓝为例，给出双侧原始格数、稀释倍数、活率与配制5 mL接种悬液的完整计算。
准备约10分钟；每份染色样本2–5分钟内计数
细胞实验进阶
HeLa CCL-2 冻存：5% DMSO 配方、每管细胞数和入库记录
以4支1 mL HeLa冻存管为例，给出95%完全培养基+5%DMSO的真实配方、2×10⁶活细胞/mL计算、降温与复苏质控。
收获及分装约60分钟；受控降温至少24小时；入库后抽管复苏
细胞实验入门
HeLa CCL-2 复苏：一管 1 mL 细胞到 T25 的定量步骤
按ATCC CCL-2产品页采用37°C约2分钟解冻、9 mL完全培养基稀释和200×g 10分钟离心，并写清最终5 mL接种量与首次换液。
准备约25分钟；解冻至接种约20分钟；跟踪72小时
细胞实验入门
Dojindo CK04 CCK-8：5000细胞铺板、10 µL显色和450 nm计算
明确使用Dojindo CK04，以HeLa三种血清条件的教学比较写出板图、100 µL体系、10 µL试剂、2小时读数、匹配空白和完整演算。
先做线性预实验约3天；正式铺板至读数约50小时
细胞实验入门
HeLa 划痕入门：24孔板铺多少、怎么洗、同一视野怎么拍
提供24孔板的教学起始密度、500 µL培养体系、200 µL枪头划痕、两次温和洗涤、0/6/12/24小时定位成像及面积闭合计算。
铺板约1–2天；划痕与0小时拍照约45分钟；随访24小时
分子实验入门
移液与梯度稀释：配出可追溯的六级 NaCl 梯度
以现成 10 mM NaCl 水溶液为母液，完成 10 倍连续稀释、直接稀释及移液称重练习，每管体积和浓度都有核对表。
45–60 分钟
分子实验入门
DNA 琼脂糖电泳：50 mL 的 1% TAE 胶逐步操作
固定为普通 0.5–3 kb PCR 产物、1% 琼脂糖胶、1×TAE 和 EtBr 后染，写清配胶、6×上样液、方向、电场和终止条件。
约 2 小时
分子实验入门
常规 PCR：50 μL 分开组分 Taq 体系与阴性对照
采用 Addgene 的普通 Taq 分组分配方，以已验证的约 1 kb 非感染性教学 DNA 为模板，完成四管反应、程序设置和电泳验证。
PCR 约 2 小时；连同电泳约 3–4 小时
分子实验入门
RNA 提取与质控：GeneJET 培养细胞柱法完整示例
从约 100 万 NIH/3T3 培养细胞沉淀开始，按 GeneJET K0731 的裂解、结合、三次洗柱和洗脱步骤操作，并给出去 DNA 与质控记录。
提取约 45–60 分钟；含去 DNA、清理及质控约 2 小时
分子实验入门
逆转录合成 cDNA：High-Capacity 20 μL 体系逐管配制
固定使用含 RNase inhibitor 的 High-Capacity cDNA Reverse Transcription Kit，500 ng RNA 输入，按官方 25/37/85°C 程序制备 cDNA 和匹配 No-RT。
约 2 小时 45 分钟，另加后续 qPCR 检查