高架十字迷宫:开放臂、中心区与安全终止记录

在安全评估过的装置上固定起点与入臂定义,分别报告开放臂时间、入臂次数和整体活动。

01本篇适用条件

仅适用于已获批且由训练合格人员全程监看的小鼠行为测定。装置存在跌落风险,安全结构、适用动物及接收设计必须经设施评估;无评估的自制高台不执行。本例臂 30×5 cm、封闭臂壁高 15 cm、离基面 50 cm、记录 5 分钟为教学参数,并非所有品系/体型通用;不以任何开放臂比例作为通用福利或疾病诊断界值。

02实验原理

两条开放臂、两条封闭臂与中心区分别编码。开放臂时间比例需说明是否以全有效时长为分母;本例用全时长,中心时间保留。开放臂入臂比例用开放/(开放+封闭)次数;运动下降可能同时降低入臂,不能仅归因为焦虑增加。

03安全与适用范围

仅供已完成设施准入、相关技能培训且纳入有效伦理批准的人员执行。先核对动物状态、操作范围与批准版本;出现疼痛、受伤、呼吸或活动异常时停止测定并依获批福利路径联系兽医。体重、肿瘤负担及行为触发条件填入本项目获批值,不采用本页数字作为通用人道终点。优先福利,不能为补齐数据延迟处置。

04材料与仪器

  • 经评估的商业高架十字迷宫、厂家认可的安全接收设计。
  • 顶置相机、计时器、照度计与固定场图。
  • 合格操作者、中性文件标签、福利联系卡与清洁用品。

05配液与用量

部件/参数教学示例实际核对
臂/中心每臂 30×5 cm,中心 5×5 cm实际尺寸、水平及连接牢固
封闭臂壁高 15 cm无锐边,视线/材料一致
架高离基面 50 cm安全评估与接收区域完整
入臂规则四爪越过中心边界开放/封闭/中心各有定义

06时间安排

阶段教学安排结束条件
前期安全与参数预实验设施确认装置适用
当日开始前 30 分钟连接、录像、照度和顺序检查无动物检查通过
每只获批适应后连续 5 min 示例时间上限或福利/安全事件
每只之后安全回笼、清洁和干燥记录实际完成时间
评分时全片核对四爪入臂与时间原片和事件表一致

07开始前的准备

预设跌落、险情、攀越与追踪丢失的处理;跌落即终止并按福利流程检查,不直接再放上去补一次。不能自行加围栏或降低开放性来解决风险,那会改变测定含义;结构调整须重新验证。固定测试时段、照度与中心起始朝向,记录既往 EPM 暴露。

小鼠红外热像与RGB相机装置及体表区域分割输出

上半部示意原文三种测试的相机与装置,下半部区分体部、尾部及像素温度分布。本篇仅借此解释固定拍摄条件与ROI,不实施原文的应激测试;不能把图中的热色直接当作核心体温。原图完整保留。

Blenkuš et al., Non-Invasive Assessment of Mild Stress-Induced Hyperthermia by Infrared Thermography in Laboratory Mice,Figure 2CC BY 4.0;Blenkuš et al. 2022,Animals查看技术来源 ↗点击图片查看原图 ↗
高架十字迷宫开放臂与封闭臂完整装置照片

原文为大鼠装置照片,小鼠版尺寸不同;用于区分开放臂、封闭臂及平台,不能照图推断本站尺寸。 所有原图panel、坐标与图例均保留。

Walf & Frye 2007, The use of the elevated plus maze as an assay of anxiety-related behavior in rodents, Figure 1© 2007 Nature Publishing Group;公开PMC图教学摘录,未声明CC许可查看技术来源 ↗点击图片查看原图 ↗

08逐步操作

  1. 核对动物状态与既往高架经历,确认批准允许该测定。运动受限或无法安全行走者先评估,不强行完成。
  2. 无动物检查底座稳定、臂连接、边缘和接收区,确认紧急停止/安全接收可实施;损坏或缺少防护即停用。
  3. 测量并记录开放臂、封闭臂与中心照度,固定相机覆盖全装置;不能把阴影或反光当成区域偏好。
  4. 按场图定义中心边界与臂 ID,试录检查时间戳、比例和存储;评分者先用练习视频统一四爪入臂判定。
  5. 按预设随机或平衡顺序进行,依获批计划适应测试房。保持操作者位置与外界噪声一致,避免组别与测试顺序混杂。
  6. 用已签认方法温和放到中心,按统一方向朝向预定开放臂;四肢获得支撑后从一致事件开始计时,立即移开转移器具。
  7. 连续录像本例 5 分钟并全程监看,避免触碰、追赶或在开放臂前挡路。达到获批异常条件或险情时立即安全终止并记录。
  8. 结束后按训练方法安全回原笼,核对身份与状态;跌落/受伤即联系设施或兽医,不能仅在表中写“技术失败”。
  9. 按认可方法清洁,满足接触和完全干燥时间;保持每只之间同样的周转规则,记录可见残留或气味问题。
  10. 盲态逐段记录开放、封闭和中心停留以及入臂时刻;身体跨界但未四爪进入不计本例入臂,时间判定亦须统一规则。
  11. 教学例有效 300 s、开放 60 s,则开放时间占比 20%;开放入臂 5 次、封闭 10 次,则开放入臂比例 5/15=33.3%。数字不是行为正常线。
  12. 报告全时长、中心时间、总入臂、异常和排除原因。重复暴露会改变行为,重测需预先设计并获批,不能把多次结果当互不相关首次测试。

09结果判断与质控

产物包括安全检查、环境与顺序表、原片、分区事件和两种比例。必须明确分母,本例 20% 时间与 33.3% 入臂回答不同问题。将低活动、冻结、感官或平衡因素纳入解释,避免把单项指标直接称为焦虑症。

高架十字迷宫的温度、开放臂时间和入臂次数结果

高架十字迷宫的温度、开放臂时间和入臂次数结果。只用于解释区域、误差、观察条件与结果,不从图中实施应激、给药或植入;体表温度不能直接等同核心体温。 所有原图panel、坐标与图例均保留。

Blenkuš et al. 2022, Non-Invasive Assessment of Mild Stress-Induced Hyperthermia by Infrared Thermography in Laboratory Mice, Figure 6CC BY 4.0;原文作者,完整原图查看技术来源 ↗点击图片查看原图 ↗
高架十字迷宫行程和平均速度的组间结果

高架十字迷宫行程和平均速度的组间结果。只用于解释区域、误差、观察条件与结果,不从图中实施应激、给药或植入;体表温度不能直接等同核心体温。 所有原图panel、坐标与图例均保留。

Blenkuš et al. 2022, Non-Invasive Assessment of Mild Stress-Induced Hyperthermia by Infrared Thermography in Laboratory Mice, Figure A2CC BY 4.0;原文作者,完整原图查看技术来源 ↗点击图片查看原图 ↗

10实验记录模板

日期/动物/文件 ID装置/照度记录起止/有效 s开放/封闭/中心 s开放/封闭入臂两种比例安全事件/处置盲态评分者
〔填写〕〔填写〕〔填写〕〔逐段求和〕〔计数〕〔计算〕〔时间及联络〕〔填写〕

11常见问题与排错

一直停在中心

保留中心时间与总活动,检查健康和环境;不从后方推向开放臂。

开放臂比例高但总入臂极少

审查分母和低活动,完整报告次数,不能仅凭比例宣称抗焦虑效果。

跌落后录像还在继续

技术文件可保留,但分析终点按安全事件标注;立即福利处置,后续是否继续由获批路径决定。

12参考资料

✓

做完最后一步,再核对原始记录。填写实际用量、起止时间与观察结果;遇到异常,先记录,再查看排错说明。